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Usando un método llamado trasplante de células germinales, demostró que las células que purificó estaban de hecho altamente enriquecidas en células madre espermatogoniales humanas.
La infertilidad afecta a uno de cada siete hombres en edad reproductiva en todo el mundo. Una idea para tratar la esterilidad masculina es la terapia con células madre espermatogoniales (CME), por la cual las células madre de los espermatozoides de los testículos se transfieren a un tubo de ensayo, se cultivan y se les estimula para convertirse en espermatozoides completamente desarrollados.
Sin embargo, un cuello de botella clave ha sido identificar las condiciones adecuadas para que las CME humanos crezcan en el laboratorio. Ha habido muchos intentos, pero en la mayoría de los casos informados no estaba claro si las células que se cultivaban eran en realidad CME, y no se utiliza de manera rutinaria ningún método publicado previamente.
Investigadores de la Facultad de Medicina de la Universidad de California en San Diego, han desarrollado un método confiable para cultivar células con las características de las CME humanas, según publican en Proceedings of the National Academy of Sciences.
Creemos que nuestro enfoque, que está respaldado por varias técnicas, incluido el análisis de secuenciación de ARN de células individuales, es un paso significativo para llevar la terapia de CME a la clínica, explica el autor principal Miles Wilkinson, profesor distinguido en el Departamento de Obstetricia, Ginecología y Ciencias de la Reproducción de la Facultad de Medicina de la Universidad de California San Diego.
Las CME son los que hacen posible que los hombres engendren hijos más allá de los 65 años. Estas células especializadas se renuevan continuamente, producen más CME y se convierten en espermatozoides tan prolíficamente que los hombres (y algunas personas transgénero, no binarias y de género fluido) producir más de 1 000 nuevos espermatozoides cada pocos segundos.
El progreso en el campo se ha visto obstaculizado por el hecho de que es extremadamente difícil distinguir las CME de otras células en los testículos. Fue un gran paso adelante cuando varios laboratorios, incluido el equipo de Wilkinson, utilizaron recientemente una técnica llamada secuenciación de ARN unicelular para definir las características moleculares probables específicas de las CME humanas.
Nuevas investigaciones
En su último esfuerzo, el equipo de Wilkinson utilizó su información de secuenciación de ARN unicelular para purificar lo que creía que podrían ser CME humanas. Usando un método llamado trasplante de células germinales, demostró que las células que purificó estaban de hecho altamente enriquecidas en CME humanas.
Luego, el equipo reunió el perfil de genes expresados en estas CME humanas para adivinar las condiciones que podrían apoyar mejor su crecimiento en el laboratorio. Utilizando más de 30 biopsias de testículos humanos, los investigadores determinaron las condiciones adecuadas necesarias para cultivar células germinales inmaduras con las características de las CME.
El ingrediente clave era un inhibidor de la vía AKT, un sistema celular que controla la división celular y la supervivencia. El equipo de Wilkinson determinó que la inhibición de AKT mantiene las CME humanos al inhibir el desarrollo de precursores de esperma en etapas posteriores. Varios inhibidores de AKT se usan actualmente para tratar el cáncer.
Con ese enfoque, los investigadores pudieron favorecer el cultivo de células humanas con las características moleculares de las CME durante dos a cuatro semanas.
A continuación, nuestro objetivo principal es aprender cómo mantener y expandir los SSC humanos por más tiempo para que puedan ser clínicamente útiles, adelanta Wilkinson.
julio 22/2020 (Médico Interactivo)
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