La fibrosis pulmonar idiopática (FPI) se caracteriza por la cicatrización del tejido pulmonar. Con el tiempo, esa cicatrización empeora hasta que los pulmones no pueden absorber suficiente oxígeno, lo que afecta la calidad de vida de la persona y finalmente conduce a la muerte. A nivel mundial, afecta a entre 13 y 20 de cada 100 000 personas, según los Institutos Nacionales de Salud de Estados Unidos.

Si bien los medicamentos actuales (y en algunos casos, un trasplante de pulmón) pueden extender la vida de un paciente más allá de los tres a cinco años previstos desde el momento del diagnóstico hasta la muerte, no hay cura.

Se desconoce la causa de la FPI, aunque muchos expertos médicos creen que probablemente sea el resultado de una combinación de factores genéticos y ambientales. La creciente evidencia también sugiere un vínculo entre la inflamación y el desarrollo y la progresión de la cicatrización del pulmón. Esa información inspiró el estudio actual, explica Anna Cargnoni, quien dirigió la investigación bajo la supervisión de la directora del CREM, la profesora Ornella Parolini.

Las células del estroma mesenquimatoso derivadas de la membrana amniótica humana (hAMSC) muestran una capacidad marcada para afectar el sistema inmunológico del cuerpo, explica. Se ha demostrado que reducen la fibrosis pulmonar en ratones, posiblemente creando un microambiente que limita la evolución de la inflamación crónica que conduce a la formación de cicatrices. Sin embargo, la capacidad de las hAMSC para modular las células inmunes, y específicamente las células B, involucradas en la inflamación pulmonar aún no se ha descrito claramente. Eso es lo que buscamos hacer en nuestro estudio.

El equipo realizó su estudio en ratones, comenzando por inducir cicatrices pulmonares con el medicamento bleomicina, que instilada intratraquealmente produce lesiones en los alvéolos (los pequeños sacos de aire en los pulmones) y la consiguiente fibrosis pulmonar.

Luego inyectaron un grupo de animales con hAMSC recién aisladas y otro grupo con hAMSC expandidas in vitro, para abordar la importante cuestión de cómo la expansión in vitro afecta las capacidades terapéuticas de las hAMSC. Un tercer grupo de animales, el grupo de control, se trató con la solución salina utilizada para inyectar hAMSC pero sin las células.

Con el fin de explorar si el tratamiento con hAMSC puede afectar las células inmunes que las lesiones inducidas por bleomicina se reclutan en los pulmones, las células inmunes se recolectaron a los cuatro, siete, nueve y 14 días después del tratamiento, desde los espacios alveolares de los animales tratados y grupos de control.

Las células inmunes de los animales se identificaron y cuantificaron mediante una técnica llamada citometría de flujo. Los tejidos pulmonares también se recolectaron al mismo tiempo y se analizaron para determinar la expresión génica de marcadores asociados con diferentes tipos de células inmunes.

Descubrimos que tanto las hAMSC recién recolectadas como las expandidas podían controlar el reclutamiento, retención y maduración de las células B en los pulmones enfermos, añade. Esto es importante porque en los pacientes con FPI, las células B forman agregados pulmonares con células T y se activan continuamente Las células T crean una condición inflamatoria autosuficiente.

Al modular las células B, las hAMSC pudieron romper este ciclo y, por lo tanto, ayudar a mitigar la progresión de la inflamación pulmonar y, en consecuencia, también la cicatrización, explica el doctor Cargnoni. Creemos que estas ideas clave sobre el potencial terapéutico de las hAMSC proporcionan más evidencia del posible uso clínico de las hAMSC en el tratamiento de la FPI y otras enfermedades fibróticas relacionadas con la inflamación.

Este estudio preclínico demuestra que las células madre derivadas del líquido amniótico tienen la capacidad de obstaculizar la inflamación y retrasar la cicatrización en el tejido pulmonar, añade Anthony Atala, editor en jefe de STEM CELLS Translational Medicine y director del Wake Forest Institute for Regenerative Medicine. Estas células podrían eventualmente usarse para nuevos tratamientos de una enfermedad pulmonar mortal para la cual todavía no se conoce una causa o cura.

mayo 29/2020 (Europa Press) – Tomado de la Selección Temática sobre Medicina de Prensa Latina. Copyright 2019. Agencia Informativa Latinoamericana Prensa Latina S.A.

Mediante el empleo de métodos proteómicos cuantitativos y otros multiparamétricos como la citometría de flujo, esta investigación ha evaluado la respuesta celular de osteosarcoma y leucemia de células T cuando los derivados del cisplatino se conjugan con bioferrofluidos a través de polímeros biocompatibles.

En concreto, se ha demostrado la eficacia del empleo de dichas nanopartículas para la eliminación precisa de las células tumorales sin alterar partes sanas del organismo. Así mismo ofrecen la posibilidad de ser diseñadas para la unión de células de cáncer concretas donde el fármaco podría ser liberado específicamente.

En la búsqueda de nuevos fármacos contra el cáncer, los complejos de metales tienen un gran potencial porque son específicos con las dianas terapéuticas y eficaces. Los agentes anticancerígenos basados en el platino representan uno de los mayores éxitos en el campo de la química orgánica medicinal. En la actualidad la biomedicina está empleando ferrofluidos, que son nanopartículas magnéticas, para la administración de fármacos.

Además ponen de manifiesto la confluencia del hallazgo fortuito y el diseño racional en el desarrollo de fármacos. De hecho, tres fármacos con platino han aprobados para el tratamiento de cáncer: cisplatino, carboplatino y oxaplatino. El uso de otros fármacos está limitado a países específicos.

Los derivados del cisplatino, son fármacos antitumorales que se emplean en la quimioterapia y presentan una actividad citotóxica potencial y baja toxicidad. Este tipo de fármaco antitumoral tiene un gran interés debido a su baja labilidad (baja inestabilidad), su carácter anfipático que le permite tener un extremo soluble en agua y otro insoluble y su posible uso en fármacos personalizados. Por todas estas características pueden representar una alternativa a otros fármacos antitumorales.

A día de hoy en la búsqueda y diseño de nuevos medicamentos se está empleando la nanoescala porque permite transportar agentes activos de los fármacos. Otra ventaja es que con el diseño adecuado de las nanopartículas pueden mantenerse en la circulación sanguínea y en consecuencia a lo largo del tiempo se acumula en el tejido tumoral. Por tanto, las nanopartículas mejoran la penetración y la retención deseada en los fármacos antitumorales. De hecho, el fármaco aprovecha la debilidad del tejido tumoral, que cuenta con una vascularización permeable y una irrigación pobre. Gracias a su dimensión tan pequeña, las nanopartículas pueden salir del vaso sanguíneo, ubicarse en el espacio intersticial tumoral y permanecer allí entre las células tumorales, liberando su contenido en el espacio extracelular del microambiente tumoral o siendo absorbidas por células cancerosas.Teniendo en cuenta las ventajas expuestas de las nanopartículas en el diseño de fármacos, es importante profundizar en la influencia exacta de dichas partículas en las células cancerígenas, en determinar su tasa de éxito, así mismo es crucial describir su capacidad para actuar con una respuesta adecuada en el ser vivo a que se suministra. Otros aspectos fundamentales son tamaño, superficie, concentración, grupos funcionales químicos que afectan en la eficacia en la absorción celular, aspecto que también está condicionado por la activación del sistema inmune del animal y/o la persona. Resulta crucial caracterizar las vías de la endocitosis, es decir, el recorrido que las nanopartículas realizan entre y dentro de las células y cuyas características provoquen la respuesta del ser vivo adecuada, con baja toxicidad y con respuestas de baja inmunidad.

De esta manera, la comunidad científica está focalizando su atención en las nanopartículas de óxido de hierro debido a sus excepcionales propiedades magnéticas, no toxicidad, biocompatibilidad y bajo coste de producción. De hecho, las nanopartículas de óxido de hierro se han empleado ya en numerosas aplicaciones In vivo. Los ferrofluidos utilizados en este trabajo están integrados por los compuestos magnéticos más biocompatibles revestidos con polímeros biocompatibles.

En este sentido, los enfoques proteómicos, empleados en este trabajo, dirigido por Manuel Fuentes, constituyen herramientas poderosas para el cribado de vías de señalización intracelular de una manera rápida y de alto rendimiento. En dicho trabajo se han estudiado las vías de señalización celular alteradas cuando se exponen células a las nanopartículas de óxido de hierro (incluyendo la combinación conjugada de platino) mediante un enfoque de proteómica cuantitativa basada en espectrometría de masas denominado SILAC (etiquetado de isótopos estables con aminoácidos en cultivo celular). Este enfoque se basa en la incorporación de aminoácidos («ligeros» o «pesados») en las proteínas para detectar las proteínas expresadas diferencialmente entre dos condiciones dadas.

Al elucidar, mediante esta investigación, las proteínas y las vías intracelulares relacionadas con estas condiciones se está contribuyendo a aumentar el conocimiento en la respuesta mediada por las nanopartículas.

En resumen, el objetivo principal de esta investigación es obtener un derivado de cisplatino conjugado a las nanopartículas de óxido de hierro, mediante métodos sencillos, con el fin de mejorar selectivamente la actividad de citotoxicidad y promover la utilidad de las nanopartículas de óxido de hierro como portadores de fármacos en líneas celulares donde los derivados de platino. Por otra parte, la combinación de estrategias (como ensayos MTT y citometría de flujo) y nuevos enfoques han permitido una amplia caracterización de las nanopartículas de óxido de hierro mismas y se han conjugado con el derivado biliar del cisplatino. Por último, estos estudios muestran las diferencias cuantitativas en los perfiles de proteínas celulares que están directamente relacionados con el transporte vesicular, estructura celular, ciclo celular, proceso biosintético, apoptosis y la regulación del ciclo celular.

julio 16/2017 (noticiasdelaciencia.com)

]]> https://boletinaldia.sld.cu/aldia/2017/07/17/plataforma-multifuncional-basada-en-nanoparticulas-de-oxido-de-hierro-eficientes-portadoras-de-farmacos-antitumorales/feed/ 0 https://boletinaldia.sld.cu/aldia/2016/09/14/identificar-subclones-benignos-y-malignos-clave-para-el-avance-en-mieloma-multiple/ https://boletinaldia.sld.cu/aldia/2016/09/14/identificar-subclones-benignos-y-malignos-clave-para-el-avance-en-mieloma-multiple/#comments Wed, 14 Sep 2016 06:05:33 +0000 http://boletinaldia.sld.cu/aldia/?p=53297 Actualmente, alrededor de 60 000 personas sufren mieloma múltiple en Europa. Cada año surgen 20 000 casos nuevos de pacientes con esta enfermedad que se salda con 15 000 fallecimientos anuales. «Estas cifras ponen de manifiesto que para una mayoría de pacientes, más del 75 %, el mieloma sigue siendo una enfermedad incurable, considera Bruno Paiva, investigador del Departamento de Hematología de la Clínica Universidad de Navarra, experto en mieloma múltiple y co-director del Laboratorio de Citometría de Flujo y co-director científico de CIMA LAB Diagnostics de la Universidad de Navarra.

Precisamente, encontrar las claves para conseguir la curación del mieloma múltiple es el objetivo prioritario de una investigación que comienza ahora y que ha recibido una importante ayuda económica del European Research Council (ERC). El trabajo del equipo de Paiva es uno de los 13 proyectos españoles que han obtenido ayudas del ERC, el único en el ámbito de la Salud.

Procedimientos vanguardistas

Para cumplir el objetivo prioritario del estudio, uno de los retos es la integración de dos técnicas: la citometría de flujo y la secuenciación masiva de nueva generación. «Son técnicas que permiten obtener información del perfil proteico y del genoma completo o de las mutaciones o alteraciones presentes en determinados genes». El elemento diferencial de este grupo investigador lo constituye, sin duda, el desarrollo en colaboración con el grupo Euroflow de una citometría de flujo de nueva generación, «que aporta una sensibilidad mucho más alta que la citometría de flujo convencional», indica. Ese mayor grado de percepción permitirá a los investigadores «aislar subclones tumorales que no se han estudiado todavía» y que los investigadores consideran «claves para entender por qué hasta la fecha no se ha podido curar la enfermedad».

Los subclones a los que se refiere Paiva incluyen las células madre tumorales, es decir, las que originan la enfermedad. Además, se refieren también a las células tumorales circulantes, que son en teoría las que difunden la enfermedad, «las que la metastatizan». Por último, se consideran subclones las células de la enfermedad mínima residual, que es la célula que persiste tras el tratamiento y que da origen a la recaída de la enfermedad, «incluso en aquellos pacientes que se consideran en remisión completa de la enfermedad mediante las técnicas diagnósticas convencionales. Para el investigador, «estudiar estas células nos va a permitir conocer, in vivo, en cada paciente, cuáles son los mecanismos moleculares que desarrolló esa célula para conseguir persistir al tratamiento».

Segunda fase del estudio

El científico destaca la correlación intrínseca que existe entre eliminar todas o el mayor número posible de células tumorales y la curación de una enfermedad. Pero en ciertos tumores, como es el mieloma múltiple, ocurre que algunos pacientes pueden curarse o nunca más recaer en la enfermedad, incluso sin tratamiento adicional, a pesar de seguir teniendo enfermedad mínima residual. De hecho, estos pacientes presentan tan buen pronóstico como aquellos en los que se no se detecta enfermedad residual. «Por eso es fundamental identificar a estos pacientes para evitar sobretratarlos». Así, los especialistas integrarán de nuevo las dos técnicas, la citometría de flujo y la secuenciación masiva de nueva generación, «para entender la genética de las células que persisten tras el tratamiento, y ver si somos capaces de distinguir los sublclones benignos de los malignos. Esto es algo que no se ha hecho hasta ahora y que nosotros queremos conseguir»

septiembre 13/2016 (Diario Médico)

]]> https://boletinaldia.sld.cu/aldia/2016/09/14/identificar-subclones-benignos-y-malignos-clave-para-el-avance-en-mieloma-multiple/feed/ 0 https://boletinaldia.sld.cu/aldia/2015/01/26/identificado-mecanismo-molecular-que-regula-la-sensibilidad-termica/ https://boletinaldia.sld.cu/aldia/2015/01/26/identificado-mecanismo-molecular-que-regula-la-sensibilidad-termica/#comments Mon, 26 Jan 2015 06:05:21 +0000 http://boletinaldia.sld.cu/aldia/?p=39432 Se  ha identificado un mecanismo molecular que actúa como regulador de la sensibilidad térmica.Este descubrimiento podría abrir nuevas vías para el desarrollo de fármacos más selectivos contra ciertas formas de dolor crónico, especialmente aquellas que se caracterizan por una hipersensibilidad a las bajas temperaturas, informaron los investigadores en la publicación de la revista Cell Report, 
 
Las neuronas sensoriales forman una densa red de finas terminaciones nerviosas en la piel que actúan como detectores moleculares de los estímulos medioambientales como la presión, la temperatura o las sustancias irritantes.  

Para descubrir este nuevo canal iónico, los investigadores utilizaron un ratón modificado genéticamente para poder identificar de forma selectiva una subpoblación de neuronas sensoriales especializadas  en detectar las señales de frío ambiental. Después, purificaron esta población de neuronas mediante técnicas especiales de citometría de flujo. Uno de estos canales, un canal de potasio conocido como TASK-3, se expresaba de forma selectiva en dicha población de receptores térmicos.

La eliminación de esta proteína mediante técnicas genéticas o farmacológicas aumenta la sensibilidad de estas neuronas a los estímulos térmicos modificando sus umbrales de respuesta.

La consecuencia es una mayor sensibilidad de los animales modificados genéticamente a los estímulos térmicos.

En un futuro se espera que el tratamiento con activadores selectivos de estos canales permita restablecer la actividad y sensibilidad de estas neuronas a sus valores normales, algo que podría plantearse como una nueva terapia en los enfermos afectados por patologías dolorosas relacionadas con la hipersensibilidad térmica.

enero 24/ 2015  (Neurología)

La baja frecuencia y el hecho de que pueden afectar a cualquier órgano del cuerpo suele dificultar el diagnóstico temprano de enfermedades ultra-raras como la hemoglobinuria paroxística nocturna (HPN), caracterizada por una destrucción crónica de los glóbulos rojos y que puede llegar a ser mortal si no se detecta y trata a tiempo. Así lo han advertido los hematólogos que han participado en un encuentro sobre la especialidad celebrado en Córdoba.

Tal como explica el Dr. Alberto Orfao, catedrático en Medicina y director del Servicio de Citometría de la Universidad de Salamanca, en HPN “es fundamental derivar el caso al hematólogo lo antes posible, ya que es el especialista que hará el diagnóstico diferencial.

La trombosis, originada por una activación incontrolada del sistema del complemento –el sistema inmune primario- que destruye de forma prematura y crónica los glóbulos rojos –lo que se llama hemólisis-, es uno de los síntomas más frecuentes de HPN y también más temidos, al ser la primera causa de muerte junto con la insuficiencia renal.

La trombosis en HPN puede afectar a diversos órganos del cuerpo. El Dr. Orfao señala que “ante una localización atípica y unas causas no explicadas por otros motivos, es decir, en la que se hayan descartado las posibles causas más frecuentes, debe hacer pensar necesariamente en la HPN, en un diagnóstico probable de esta enfermedad”.

La prueba que establece el diagnóstico de certeza en esta patología es la citometría de flujo, una técnica que permite identificar las características de las células, detectar este defecto genético y saber la proporción de células anómalas.

Así lo establecen las guías clínicas de consenso en el abordaje de la HPN, tanto la nacional –elaborada por el Grupo de Trabajo en HPN de la Sociedad Española de Hematología y Hemoterapia- como las internacionales.

Actualización frecuente

Para confirmar el diagnóstico de HPN mediante citometría de flujo es necesario analizar al menos dos grupos de células sanguíneas. “No sólo los glóbulos rojos que se destruyen de forma crónica en la HPN, porque precisamente por ello pueden dar resultados bajos que estén falseados», expone el Dr. Orfa. «Inicialmente, la citometría de flujo para HPN debe realizarse en los monocitos y los neutrófilos, al ser el tipo de células más afectadas y en las que más fácilmente se ve la presencia de defecto genético que caracteriza a la enfermedad».

En España prácticamente todos los laboratorios de hematología e inmunología realizan esta técnica. Asimismo, indica este experto, «los responsables de los laboratorios se reúnen con relativa frecuencia para actualizar su forma de trabajar, todo ello mediante el sistema de control externo de la Sociedad Ibérica de Citometría, en la que actualmente participan cerca de 20 centros de toda España”.
junio 10/2013 (JANO)

Entre la redacción del primer y el segundo artículo, los cambios en este ámbito han sido muy numerosos. Uno de los aspectos más relevantes es la descripción de los transportadores multidroga como posibles reguladores de la transducción de la señal tanto en células madre como en células madre tumorales, además de producir resistencia a la quimioterapia.

La dificultad en identificar estas células y poder estudiarlas está impidiendo que se conozca cuál es su función fisiológica en humanos.

«Por este motivo, nos estamos planteando estudiar el papel de los transportadores multidroga en la regulación de la transducción de la señal en las células madre y analizar su función protectora en las vías de señalización que son fundamentales para el mantenimiento de este fenotipo de célula madre», ha explicado Petriz, que preside la Sociedad Ibérica de Citometría y coordina su grupo de trabajo sobre células madre.

Las células madre de la side population son un tipo muy minoritario que se encuentra en todos los tejidos estudiados hasta la fecha en humanos, en una proporción muy pequeña. Como ha recordado Petriz, la dificultad en identificar estas células y poder estudiarlas a nivel básico está impidiendo que se conozca cuál es su función fisiológica en humanos.

«Parece que está muy relacionada con la renovación de los tejidos y el mantenimiento de la homeostasis tisular durante toda la vida. Por experimentos en ratones se sabe que estas células tienen una gran plasticidad y, por ejemplo, las que se encuentran en la médula ósea no solo generan sangre, sino que pueden generar cualquier otro tipo de tejido. Y, de la misma manera, las que se encuentran en el cerebro no solo tienen capacidad de regenerar el cerebro sino que, debido a esta gran plasticidad, tienen capacidad de formar sangre, músculo u otro tipo de tejido».

Primeros pasos
Por eso, se pensó que estas células podrían tener un gran potencial terapéutico en humanos, ya que podrían utilizarse de manera autóloga en medicina regenerativa expandiéndolas primero y diferenciándolas después al tejido de interés. Pero «en humanos es aún un campo muy desconocido, aunque se han hecho muchas aproximaciones en ratón. Las células madre de la side population se encuentran en tumores y en leucemias, por lo que pueden tener una importancia como células madre propias tanto del tumor como de la leucemia; por lo que esta sería la verdadera diana terapéutica que interesaría eliminar a través de la terapia en cáncer».

MEJORAS TECNOLÓGICAS
Los avances en la citometría de flujo han propiciado la comprensión de todos los mecanismos. «Este es un aspecto fundamental porque, en la actualidad, no tenemos ningún marcador fenotípico que nos permita identificar estas células tan minoritarias: solo puede realizarse por la función derivada de la expresión de estos transportadores multidroga tanto en las células madre como en las células madre tumorales de la side population. Y la citometría de flujo es la única herramienta que permite identificarlas y aislarlas vivas para expandirlas o hacer estudios posteriores de biología molecular y tratar de comprender mucho mejor su compleja biología», ha destacado Petriz.
abril 15/2012 (Diario Médico)